酶是土壤元素循环的动力。生态计量学理论指出，土壤酶的合成和分泌由微生物能量（C）、养分元素（N、P等）需求与环境供应之间的不平衡所导致。微生物生物量的C/N/P为42:6:1~60:7:1，而作为微生物的主要底物，土壤有机质（SOM）和植物残体的C/N/P分别为186:31:1和3000:46:1。因此，在对有机质的利用过程中，微生物分泌大量胞外酶用于养分元素挖掘，以满足自身营养需求。

　　陆地生态系统中存在着普遍的磷限制。热带、亚热带地区是水稻的主产区，由于长期的风化、淋溶，该地区土壤缺磷现象尤为突出。为了维持高产，磷肥在该地区水稻生产中广泛施用，改变了土壤和水稻组织的C/P。水稻将光合碳的10~55%输送到根部，这部分碳在水稻收割后几乎完全留在地下，为微生物提供了大量易利用碳源，在其周围形成了撂荒期稻田的主要微生物活性热区。磷肥施用引起死亡根系周际微环境C/P的变化，影响微生物胞外酶的合成和分泌，可能对土壤元素循环和肥力维持有重要调控意义。然而，到目前为止，相关研究仍少见报道。酶活在土壤中的分布具有高度异质性。残根周际作为重要的酶活热区，其范围通常为根中心向外数毫米，面积狭小，取样困难。传统的取样方法把酶活热区与非热区土壤混合，掩盖了热区土壤酶的真实活性和空间分布特征。

　　为此，中国科学院亚热带农业生态研究所研究人员以缺磷水稻土（Olsen- P < 5 mg kg^-1）和亚洲栽培稻（Oryza Sativa L.）为材料，采用土壤酶谱技术研究了施磷（80mg kg^-1的磷肥，P80）与不施磷（P0）根系C/P对水稻收割后的150 d内，残根周际β-葡萄糖苷酶（BG）、β-纤维二糖水解酶（CBH）酸性磷酸酶（ACP）和碱性磷酸酶（ALP）活性空间分布动态特征的影响，并计算C获取酶（BG、CBH）与P获取酶（ACP、ALP）的活性比（CP获取比，C/P acquisition ratio），计算方法如下：

　　C/P acquisition ratio = ln(BG + CBH) : ln(ACP + ALP)

　　其中，BG、CBH、ACP和ALP分别为这四种酶在热区的总活性（Total enzyme activity in hotspots, TE_H）

　　TE_H = E_H × A_H × S

　　其中，E_H为热区的平均酶活，A_H为酶活热区相对面积，S为根窗面土壤表面积。　　

　　结果表明，在地上部剪除前（0d）和剪除后的第7，21，42，90，150d时进行BG、CBH、ACP和ALP活性的原位酶谱图像采集。结果表明，地上部剪除前，四种酶的活性热区均沿根分布。地上部剪除后的150d内，BG和CBH的活性热区依然维持沿根分布特性，ACP和ALP活性热区则分散于残根周际和非周际（图1）。培养7天后，BG和CBH的活性热区面积与地上部剪除前相比有所降低，但仅在P0中差异显著，而后升高，并分别在21和90d后达到峰值（图1）。在150 d的培养过程中，与P0相比，施磷使BG和CBH的活性热区面积分别增加了2.8-11.4和1.8-48倍。剪除地上部后的前21d，ACP和ALP活性热区面积在P0中不断增大，而在P80中不断减小，21d时，P0中磷酸酶活性热区面积大于P80。而后磷酸酶活性热区在P0中持续降低，150d时显著低于峰值，而在P80中持续升高，到达最大值后（第90d）后急剧下降。施磷未影响BG和CBH活性热区面积随时间的变化规律，却推迟了ACP和ALP活性热区面积最大值的出现（图1）。

　　剪除地上部前，酶活热区CP获取比 在P0和P80间无显著差异。剪除地上部后前21d，CP获取比先降低后升高，并于21d时达到峰值。而后，P0中CP获取比维持在1.0左右，直到150d显著降低；P80处理的CP获取比在第21d时为1.56，随着培养的继续逐渐降低，42-90d时约为1.1，150d时降低至0.42。整个培养过程中，P80的CP获取比 显著低于P0，即低底物C/P引发高CP获取比。

　　综上，水稻残根周际BG、CBH、ACP和ALP活性时空分布对残根C/P的响应具有酶特异性。施磷增大了残根周际C获取酶的活性热区面积，但未影响其随降解时间的变化特征。与P0相比，P80中磷酸酶的活性热区面积在前21d显著较小，且热区面积最大值的出现推迟，可能是由于低C/P根系降解过程中残根内P的释放导致土壤有效磷升高，抑制和土壤磷酸酶活性。在缺磷土中生长的水稻，残根C/P较高，降解过程中，微生物具有较低的C/P获取比 ，导致C可利用性的升高和P可利用性的降低，加剧了土壤C、P失衡；而施磷土中生长得水稻，残根C/P低，降解过程中发生C、P的同步释放，维持了土壤C、P平衡（图2）。

　　该项研究近期以题为C/P stoichiometry of dying rice root defines the spatial distribution and dynamics of enzyme activities in root-detritusphere发表在Biology and Fertility of Soils上。该研究得到了国家重点研发项目、国家自然科学基金、中科院亚热带农业研究所青年创新团队项目的资助。

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图1 碳获取酶（BG、CBH）与磷获取酶（ACP、ALP）的酶谱动态图

图2 水稻残根C/P计量比对残根周际C、P获取酶活性和土壤C、P平衡的调控机制示意图